Čistiace zariadenie na čistenie Oligo

1. Čistenie gélovou elektroforézou chromatografiou
Na čistenie použite denaturačnú elektroforéznu chromatografiu na polyakrylamidovom géli.Denaturačným činidlom je všeobecne 4M formamid alebo 7M močovina, koncentrácia akrylamidu je medzi 5-15% a podiel metakrylamidu je hlavne medzi 2-10%.
Po elektroforéze je potrebné určiť polohu pásu nukleovej kyseliny pod ožiarením ultrafialovým svetlom, gél obsahujúci cieľovú nukleovú kyselinu sa odreže, nukleová kyselina sa rozdrví a vylúhuje a potom sa lúhovací roztok zahustí, odsolí, kvantifikované a lyofilizované.

2. DMT-On, HPLC purifikácia
Počas syntézy zvoľte režim DMT-On, surový produkt sa odstredil a skoncentroval pri teplote miestnosti, aby sa odstránil nadbytok amoniaku po aminolýze.
Separácia sa uskutočnila s použitím C18 kolóny s acetonitrilom a 10% trietylamín-kyselinou octovou (TEAA) ako eluentom.Po dokončení elúcie sa skoncentruje a potom sa DMT skupina odstráni kyselinou trifluóroctovou.Po neutralizácii sa niektoré soli a malé molekuly odstránia cez odrezanú trubicu a nakoniec sa odsolia.

Touto metódou je možné získať produkt s vyššou čistotou, je však potrebné dávať pozor na výskyt depurinácie.

3. DMT-Off, HPLC purifikácia
Počas syntézy vyberte DMT-Off a surový produkt sa odstredil a skoncentroval pri teplote miestnosti, aby sa odstránil nadbytok amoniaku po amonolýze.
Separácia sa uskutočnila s použitím C18 kolóny s acetonitrilom a 10% trietylamín-kyselinou octovou vo vode ako eluentom.Po dokončení separácie a kvantifikácii sa alikvóty lyofilizujú.

Táto metóda vyžaduje starostlivé nastavenie separačných podmienok a môže tiež získať relatívne čisté cieľové molekuly.